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品牌 | 其他品牌 | CAS | 詳見說明書 |
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分子式 | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
分子量 | 詳見說明書 | 貨號 | SNL-023 |
規(guī)格 | T25瓶 | 供貨周期 | 現貨 |
主要用途 | 實驗 | 應用領域 | 化工,生物產業(yè),能源 |
---------尚恩生物 I8627859203----------
3T6-Swiss albino小鼠胚胎成纖維細胞系
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二、細胞培養(yǎng)操作說明
1.細胞培養(yǎng)需要充足經驗,新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經驗的人建議在專業(yè)人士指導下進行操作,尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度。
2.部分細胞在傳代后時,會有以下現象:細胞內會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞。以上都是細胞培養(yǎng)常見現象,不影響細胞增殖和實驗。
3.細胞內的黑色顆粒是細胞外分泌泡、細胞器折光或者細胞膜表面物質,這個屬于細胞自身特性,無法清除也無法改變,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
4.不同品牌胰M溶液成分不一樣,消化活性差別比較大,更換胰M品牌時需重新摸索消化時間,以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,此時結束消化最佳,避免消化過度導致細胞死亡。細胞消化后比較脆弱,吹打力度不要過大,不要產生過多氣泡,否則會嚴重影響細胞狀態(tài)。
5.不同細胞生長速度差異較大,所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時生長較慢、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代。
6.細胞生長偏慢時,可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復正常后換回10%血清。
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