BGC823細(xì)胞人胃腺癌細(xì)胞低分化培養(yǎng)

BGC823細(xì)胞人胃腺癌細(xì)胞低分化培養(yǎng)

---尚恩生物 186278592O3---

注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

收貨處理方式（T25瓶/凍存管）

【T25】

①快遞保存溫度：室溫

②初步平衡：T25瓶表面消毒后，放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上

③處理方式：吸走大部分培養(yǎng)基，留10-12ml培養(yǎng)基，拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代，若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上

④接種方式：T25傳代第①次建議1:2傳代，即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項：若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮，T25瓶不開封，放至37度培養(yǎng)箱過夜，若細(xì)胞貼壁即說明活性正常，按正常操作消化傳代即可；若未貼壁，收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后，將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中，同時原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基，可以收集起來，1500rpm離心5min后，取上清4度保存，用于培養(yǎng)細(xì)胞，以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基

【凍存管】

①快遞保存溫度：液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)

②初步平衡：無須平衡，直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式：37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞，直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右，1min為宜，棄上清，沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿，顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照，24h后換液一次

④接種方式：一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

⑤注意事項：收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完，檢查凍存管是否融化，若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察，若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存，以上情況及時反饋
干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右，長時間保存會出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳，我方將不提供免費售后服務(wù)

特殊情況：

1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況，及時拍照聯(lián)系銷售反饋，按指導(dǎo)進行進一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管，請放心使用。

2.若無法觀察到細(xì)胞，建議收集細(xì)胞培養(yǎng)基，1200rpm離心5min，觀察細(xì)胞沉淀量，并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后，取部分懸液放到計數(shù)板或者載玻片上觀察細(xì)胞。

3.部分細(xì)胞增殖較快，發(fā)貨細(xì)胞量較多時，培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時，需要及時觀察培養(yǎng)基顏色變化，縮短培養(yǎng)基換液周期，并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。

4.收貨當(dāng)天不處理細(xì)胞時，T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜，但不建議超過24h；凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)，必須一周內(nèi)復(fù)蘇一只培養(yǎng)檢查，否則將超過一周售后期。

關(guān)于售后：

1.所有細(xì)胞免費售后期為一周，一周內(nèi)細(xì)胞培養(yǎng)出現(xiàn)異常及時拍照反饋。超出一周沒有任何反饋視為細(xì)胞培養(yǎng)正常，后期若出現(xiàn)培養(yǎng)問題不再免費重發(fā)。

2. 申請售后時請?zhí)峁┘?xì)胞收貨時及反饋售后當(dāng)天細(xì)胞清晰照片及培養(yǎng)信息，若無清晰照片及相應(yīng)信息，不予免費售后；若文件較多不方便在線聯(lián)系或傳送，可以向銷售索要細(xì)胞情況表，填寫后反饋給銷售。

3. 售后僅針對由于細(xì)胞自身狀態(tài)問題導(dǎo)致不可傳代的情況，若客戶收貨一周內(nèi)已經(jīng)傳代或轉(zhuǎn)移細(xì)胞多次，出現(xiàn)死亡或者污染時不予免費售后；若客戶在我方未允許的情況下，擅自遺棄細(xì)胞，視為客戶自身問題導(dǎo)致細(xì)胞異常，不予免費售后。

4. 細(xì)胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同，導(dǎo)致細(xì)胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異，對于此類細(xì)胞適應(yīng)環(huán)境生長的行為，不予過度解釋或免費售后。

5. 凍存細(xì)胞發(fā)貨2管，客戶先復(fù)蘇一支，若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶未反饋并復(fù)蘇2管失敗，我方將不提供免費售后服務(wù)。凍存細(xì)胞售后均發(fā)復(fù)蘇培養(yǎng)的，若要重發(fā)凍存細(xì)胞，需補加干冰運輸費用。

6. 客戶自行凍存細(xì)胞一定要注意凍存后復(fù)蘇一管檢查凍存活性，避免凍存死亡導(dǎo)致絕種。我方不對客戶凍存細(xì)胞死亡負(fù)責(zé)，客戶凍存細(xì)胞死亡時不予免費售后。

7. 細(xì)胞收貨后，請收集發(fā)貨培養(yǎng)基培養(yǎng)至少一瓶細(xì)胞，用于確定細(xì)胞培養(yǎng)條件及實驗操作是否合適。

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U251人膠質(zhì)瘤細(xì)胞

U-87 MG人腦星形膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞

SK-OV-3人卵巢癌細(xì)胞

AsPC-1人轉(zhuǎn)移胰腺腺癌細(xì)胞

BxPC-3人原位胰腺腺癌細(xì)胞

PANC-1人胰腺癌細(xì)胞

等.....