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Colo320細(xì)胞人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系

簡要描述:Colo320細(xì)胞人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系
細(xì)胞名稱:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱:Colo-320
細(xì)胞貨號:SNL-128
細(xì)胞種屬:人
生長情況:半貼壁

  • 產(chǎn)品型號:SNL-128
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-05-24
  • 訪  問  量:555
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-128
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

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Colo320細(xì)胞人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系

Colo320細(xì)胞人結(jié)腸腺癌細(xì)胞系

---尚恩生物 186278592O3---

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:人結(jié)腸腺癌細(xì)胞
細(xì)胞別稱:Colo-320
細(xì)胞貨號:SNL-128
細(xì)胞種屬:人
生長情況:半貼壁
培養(yǎng)條件:1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面吹下細(xì)胞;
2.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
4.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項半貼壁細(xì)胞會附著瓶底,但貼壁不緊,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細(xì)胞面就會脫落,不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
我們推薦使用尚恩生物Colo-320(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)專用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-128)作為體外培養(yǎng)Colo-320(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞)的培養(yǎng)基。


收貨處理方式(T25瓶/凍存管)

T25】

①快遞保存溫度:室溫

②初步平衡:T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上

③處理方式:吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上

④接種方式:T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶

⑤注意事項:若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養(yǎng)箱過夜,若細(xì)胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細(xì)胞,以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基

【凍存管】

①快遞保存溫度:液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)

②初步平衡:無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存

③處理方式:37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞,直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照,24h后換液一次

④接種方式:一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶

⑤注意事項:收貨時若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,以上情況及時反饋
干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,長時間保存會出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費售后服務(wù)

特殊情況:

1.若培養(yǎng)瓶或者凍存管出現(xiàn)破碎或漏液情況,及時拍照聯(lián)系銷售反饋,按指導(dǎo)進(jìn)行進(jìn)一步處理。若只是外包裝破損一般不影響培養(yǎng)瓶和凍存管,請放心使用。

2.若無法觀察到細(xì)胞,建議收集細(xì)胞培養(yǎng)基,1200rpm離心5min,觀察細(xì)胞沉淀量,并用少量培養(yǎng)基重懸沉淀后,取部分懸液放到計數(shù)板或者載玻片上觀察細(xì)胞。

3.部分細(xì)胞增殖較快,發(fā)貨細(xì)胞量較多時,培養(yǎng)基可能出現(xiàn)顏色變黃現(xiàn)象。繼續(xù)培養(yǎng)使用此類培養(yǎng)基時,需要及時觀察培養(yǎng)基顏色變化,縮短培養(yǎng)基換液周期,并每瓶多加2-3ml培養(yǎng)基。

4.收貨當(dāng)天不處理細(xì)胞時,T25瓶可以消毒拆封口膜后不擰開瓶蓋放37度培養(yǎng)箱靜置過夜,但不建議超過24h;凍存管可以直接放液氮長期保存或-80度3天以內(nèi),必須一周內(nèi)復(fù)蘇一只培養(yǎng)檢查,否則將超過一周售后期。


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