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PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

簡要描述:PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)
細胞名稱:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)
細胞別稱:PC-12
細胞貨號:SNL-124
細胞種屬:大鼠
生長情況:貼壁

  • 產品型號:SNL-124
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-05-24
  • 訪  問  量:517
詳細介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-124
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應用領域化工,生物產業(yè),能源

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PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

PC-12大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)

---尚恩生物 186278592O3---

一、細胞基本屬性

細胞名稱:大鼠腎上腺嗜鉻細胞瘤細胞(高分化)
細胞別稱:PC-12
細胞貨號:SNL-124
細胞種屬:大鼠
生長情況:貼壁
培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml售后
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰m,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰m消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3. 將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案



細胞培養(yǎng)說明

1. 細胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗,新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人建議在專業(yè)人士指導下進行操作,尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度。

2. 部分細胞在傳代后時,會有以下現(xiàn)象:細胞內會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞。以上都是細胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,不影響細胞增殖和實驗。

3. 細胞內的黑色顆粒是細胞外分泌泡、細胞器折光或者細胞膜表面物質,這個屬于細胞自身特性,無法清除也無法改變,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm(150g)離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。

4. 不同品牌胰m溶液成分不一樣,消化活性差別比較大,更換胰m品牌時需重新摸索消化時間,以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,此時結束消化最佳,避免消化過度導致細胞死亡。細胞消化后比較脆弱,吹打力度不要過大,不要產生過多氣泡,否則會嚴重影響細胞狀態(tài)。

5. 不同細胞生長速度差異較大,所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時生長較慢、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代。

6. 細胞生長偏慢時,可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復正常后換回10%血清

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