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A549細胞人肺腺癌細胞試劑盒

簡要描述:A549細胞人肺腺癌細胞試劑盒
細胞名稱:人肺腺癌細胞
細胞別稱:A549; A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549
細胞貨號:SNL-089
細胞種屬:人
生長情況:貼壁

  • 產(chǎn)品型號:SNL-089
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-05-30
  • 訪  問  量:509
詳細介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-089
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

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A549細胞人肺腺癌細胞試劑盒

A549細胞人肺腺癌細胞試劑盒

---尚恩生物 186278592O3---


細胞基本屬性
細胞名稱:人肺腺癌細胞
細胞別稱:A549; A 549; A549; NCI-A549; A549/ATCC; A549 ATCC; A549ATCC; hA549
細胞貨號:SNL-089
細胞種屬:人
生長情況:貼壁
培養(yǎng)條件:H-DMEM+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天

培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml

傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)

傳代方法

1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;

2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;

3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;

4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;

5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;

6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;

7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;

8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

注意事項 不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


細胞凍存操作

凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);

凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管

凍存方法

1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;

2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;

3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項 凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案


細胞培養(yǎng)說明

1. 細胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗,新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進行操作,尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度。

2. 部分細胞在傳代后時,會有以下現(xiàn)象:細胞內(nèi)會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞。以上都是細胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,不影響細胞增殖和實驗。

3. 細胞內(nèi)的黑色顆粒是細胞外分泌泡、細胞器折光或者細胞膜表面物質(zhì),這個屬于細胞自身特性,無法清除也無法改變,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm(150g)離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。

4. 不同品牌胰M溶液成分不一樣,消化活性差別比較大,更換胰M品牌時需重新摸索消化時間,以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,此時結(jié)束消化最佳,避免消化過度導(dǎo)致細胞死亡。細胞消化后比較脆弱,吹打力度不要過大,不要產(chǎn)生過多氣泡,否則會嚴重影響細胞狀態(tài)。

5. 不同細胞生長速度差異較大,所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時生長較慢、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代。

6. 細胞生長偏慢時,可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回10%血清


關(guān)于售后:

1.所有細胞免費售后期為一周,一周內(nèi)細胞培養(yǎng)出現(xiàn)異常及時拍照反饋。超出一周沒有任何反饋視為細胞培養(yǎng)正常,后期若出現(xiàn)培養(yǎng)問題不再免費重發(fā)。

2. 申請售后時請?zhí)峁┘毎肇洉r及反饋售后當天細胞清晰照片及培養(yǎng)信息,若無清晰照片及相應(yīng)信息,不予免費售后;若文件較多不方便在線聯(lián)系或傳送,可以向銷售索要細胞情況表,填寫后反饋給銷售。

3. 售后僅針對由于細胞自身狀態(tài)問題導(dǎo)致不可傳代的情況,若客戶收貨一周內(nèi)已經(jīng)傳代或轉(zhuǎn)移細胞多次,出現(xiàn)死亡或者污染時不予免費售后;若客戶在我方未允許的情況下,擅自遺棄細胞,視為客戶自身問題導(dǎo)致細胞異常,不予免費售后。

4. 細胞在不同實驗室培養(yǎng)由于所使用培養(yǎng)基及血清品牌、個人操作習(xí)慣、培養(yǎng)瓶品牌等諸多培養(yǎng)條件不盡相同,導(dǎo)致細胞培養(yǎng)形態(tài)、生長速度、貼壁情況均可能有所差異,對于此類細胞適應(yīng)環(huán)境生長的行為,不予過度解釋或免費售后。

5. 凍存細胞發(fā)貨2管,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶未反饋并復(fù)蘇2管失敗,我方將不提供免費售后服務(wù)。凍存細胞售后均發(fā)復(fù)蘇培養(yǎng)的,若要重發(fā)凍存細胞,需補加干冰運輸費用。

6. 客戶自行凍存細胞一定要注意凍存后復(fù)蘇一管檢查凍存活性,避免凍存死亡導(dǎo)致絕種。我方不對客戶凍存細胞死亡負責(zé),客戶凍存細胞死亡時不予免費售后。

7. 細胞收貨后,請收集發(fā)貨培養(yǎng)基培養(yǎng)至少一瓶細胞,用于確定細胞培養(yǎng)條件及實驗操作是否合適。


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