品牌 | 其他品牌 | CAS | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
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分子式 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 純度 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) |
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分子量 | 詳見(jiàn)說(shuō)明書(shū) | 貨號(hào) | SNL-069 |
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規(guī)格 | T25瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
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主要用途 | 實(shí)驗(yàn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 化工,生物產(chǎn)業(yè),能源 |
HT29細(xì)胞人結(jié)腸癌細(xì)胞|通過(guò)STR鑒定
HT29細(xì)胞人結(jié)腸癌細(xì)胞|通過(guò)STR鑒定
尚恩生物 186278592O3
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng)人結(jié)腸癌細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)稱(chēng) HT-29
細(xì)胞貨號(hào)SNL-069
細(xì)胞種屬人
生長(zhǎng)情況貼壁
培養(yǎng)條件McCoy’s 5a+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰M消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案