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B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商

簡要描述:B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商
細(xì)胞名稱戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
細(xì)胞別稱B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D
細(xì)胞貨號(hào)SNL-026
細(xì)胞種屬絨猴
生長情況懸浮

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-05-31
  • 訪  問  量:630
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號(hào)SNL-026
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實(shí)驗(yàn)應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),能源

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------尚恩生物 I8627859203--------

B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商

B95 8戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞高校合作商

一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱戎猴EBV轉(zhuǎn)化的白細(xì)胞
細(xì)胞別稱B95-8; B95.8; B 95.8; B 95-8; B-95-8; B958; GM07404; GM07404D
細(xì)胞貨號(hào)SNL-026
細(xì)胞種屬絨猴
生長情況懸浮
培養(yǎng)條件1640+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips:
1.細(xì)胞懸浮圓形生長,聚團(tuán)或分散生長;
2.圓形透亮、細(xì)胞膜完整的細(xì)胞是活細(xì)胞,如果無法判斷,可以取少量細(xì)胞用臺(tái)盼藍(lán)染色后計(jì)數(shù)確定細(xì)胞活率;
3.懸浮細(xì)胞密度維持1E5-5E5/ml之間,密度過低或者過高可能會(huì)影響細(xì)胞狀態(tài);


處理步驟T25瓶凍存管
1快遞保存溫度室溫液氮長期保存或-80度3天以內(nèi)
2初步平衡T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存
3處理方式吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞,直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照,24h后換液一次
4接種方式T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶
5注意事項(xiàng)若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養(yǎng)箱過夜,若細(xì)胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時(shí)原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng)
發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細(xì)胞,以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基
收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,以上情況及時(shí)反饋
干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,長時(shí)間保存會(huì)出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費(fèi)售后服務(wù)




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