簡要描述:Ana1小鼠巨噬細(xì)胞ANA1動(dòng)物細(xì)胞細(xì)胞名稱小鼠巨噬細(xì)胞細(xì)胞別稱Ana-1; ANA1細(xì)胞貨號SNL-020細(xì)胞種屬小鼠生長情況懸浮
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品牌 | 其他品牌 | CAS | 詳見說明書 |
---|---|---|---|
分子式 | 詳見說明書 | 純度 | 詳見說明書 |
分子量 | 詳見說明書 | 貨號 | SNL-020 |
規(guī)格 | T25瓶 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 實(shí)驗(yàn) | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 環(huán)保,化工,生物產(chǎn)業(yè) |
-----尚恩生物 I8627859203-----
Ana1小鼠巨噬細(xì)胞ANA1動(dòng)物細(xì)胞
Ana1小鼠巨噬細(xì)胞ANA1動(dòng)物細(xì)胞
一、細(xì)胞基本屬性
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
1.細(xì)胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗(yàn),新手或者沒有類似細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進(jìn)行操作,尤其注意無菌操作、貼壁細(xì)胞消化時(shí)間及細(xì)胞培養(yǎng)密度。
2.部分細(xì)胞在傳代后時(shí),會(huì)有以下現(xiàn)象:細(xì)胞內(nèi)會(huì)有黑色小點(diǎn)、細(xì)胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細(xì)胞。以上都是細(xì)胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,不影響細(xì)胞增殖和實(shí)驗(yàn)。
3.細(xì)胞內(nèi)的黑色顆粒是細(xì)胞外分泌泡、細(xì)胞器折光或者細(xì)胞膜表面物質(zhì),這個(gè)屬于細(xì)胞自身特性,無法清除也無法改變,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細(xì)胞庫細(xì)胞照片。細(xì)胞外的黑色顆粒大部分是細(xì)胞碎片,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細(xì)胞重新接種,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細(xì)胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時(shí)碎片比較少,傳代時(shí)可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。
4.不同品牌胰m溶液成分不一樣,消化活性差別比較大,更換胰m品牌時(shí)需重新摸索消化時(shí)間,以消化到細(xì)胞間隙變大但未漂浮為準(zhǔn),此時(shí)結(jié)束消化最佳,避免消化過度導(dǎo)致細(xì)胞死亡。細(xì)胞消化后比較脆弱,吹打力度不要過大,不要產(chǎn)生過多氣泡,否則會(huì)嚴(yán)重影響細(xì)胞狀態(tài)。
5.不同細(xì)胞生長速度差異較大,所有細(xì)胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時(shí)生長較慢、密度較低的細(xì)胞需要傳代時(shí)按1:2傳代,生長較快、密度較高的細(xì)胞可以按1:4傳代。
6.細(xì)胞生長偏慢時(shí),可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時(shí)間,待細(xì)胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回10%血清。
處理步驟 | T25瓶 | 凍存管 | |
1 | 快遞保存溫度 | 室溫 | 液氮長期保存或-80度3天以內(nèi) |
2 | 初步平衡 | T25瓶表面消毒后,放37度培養(yǎng)箱平衡復(fù)溫2h以上 | 無須平衡,直接放入-80冰箱或者液氮罐保存 |
3 | 處理方式 | 吸走大部分培養(yǎng)基,留10-12ml培養(yǎng)基,拍照并觀察細(xì)胞。密度80%以上即可吸走培養(yǎng)基消化傳代,若密度低于80%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細(xì)胞密度80%以上 | 37度水浴搖晃盡快融化細(xì)胞,直接在凍存管內(nèi)將細(xì)胞離心。離心轉(zhuǎn)速以離心力150g(約900rpm)左右,1min為宜,棄上清,沉淀用新鮮培養(yǎng)基重懸后接種到10cm培養(yǎng)皿,顯微鏡下觀察細(xì)胞并拍照,24h后換液一次 |
4 | 接種方式 | T25傳代第①次建議1:2傳代,即瓶T25傳成兩瓶 | 一管細(xì)胞建議接種到10cm培養(yǎng)皿或者T25瓶 |
5 | 注意事項(xiàng) | 若細(xì)胞出現(xiàn)漂浮,T25瓶不開封,放至37度培養(yǎng)箱過夜,若細(xì)胞貼壁即說明活性正常,按正常操作消化傳代即可;若未貼壁,收集細(xì)胞培養(yǎng)基離心后,將細(xì)胞重懸接種到新的培養(yǎng)瓶中,同時(shí)原瓶還貼壁的細(xì)胞加培養(yǎng)基繼續(xù)培養(yǎng) 發(fā)貨T25瓶裝滿大約有75ml培養(yǎng)基,可以收集起來,1500rpm離心5min后,取上清4度保存,用于培養(yǎng)細(xì)胞,以平穩(wěn)過渡到客戶自己的培養(yǎng)基 | 收貨時(shí)若發(fā)現(xiàn)干冰化完,檢查凍存管是否融化,若已融化需直接離心細(xì)胞接種觀察,若未融化可以將細(xì)胞按正常步驟保存,以上情況及時(shí)反饋 干冰發(fā)貨的細(xì)胞只能在-80保存3天左右,長時(shí)間保存會(huì)出現(xiàn)活性下降。干冰發(fā)貨均為兩支,客戶先復(fù)蘇一支,若復(fù)蘇失敗及時(shí)聯(lián)系我方并在我方指導(dǎo)下復(fù)蘇第二支。若客戶同時(shí)復(fù)蘇兩支均狀態(tài)不佳,我方將不提供免費(fèi)售后服務(wù) |
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