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HBL 100細胞人整合SV40基因的乳腺上皮細胞

簡要描述:HBL 100細胞人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
細胞名稱人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
細胞別稱HBL-100; HBL 100; HBL100
細胞貨號SNL-012
細胞種屬人
生長情況貼壁

  • 產(chǎn)品型號:SNL-012
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時間:2023-05-31
  • 訪  問  量:552
詳細介紹
品牌其他品牌CAS詳見說明書
分子式詳見說明書純度詳見說明書
分子量詳見說明書貨號SNL-012
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應(yīng)用領(lǐng)域化工,生物產(chǎn)業(yè),能源
生長情況貼壁

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----尚恩生物 I8627859203----

HBL 100細胞人整合SV40基因的乳腺上皮細胞

HBL 100細胞人整合SV40基因的乳腺上皮細胞

一、細胞基本屬性

細胞名稱:人整合SV40基因的乳腺上皮細胞
細胞別稱HBL-100; HBL 100; HBL100
細胞貨號SNL-012
細胞種屬
生長情況貼壁
培養(yǎng)條件1640+10%FBS+1%雙抗

培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%


二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰M消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手建議)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手建議);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2. 將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復(fù)蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調(diào)整實驗方案
Tips:
1.細胞貼壁較弱,發(fā)貨易漂浮成團,消化時間偏短,注意控制消化時間并避免細胞成團;
2.細胞密度較高,培養(yǎng)基營養(yǎng)不足時細胞易脫落,注意不要長時間高密度培養(yǎng);

3.細胞在室溫放置太久易成片脫落漂浮,也不要使用太冷的培養(yǎng)基和PBS處理細胞;


四、細胞培養(yǎng)說明

1. 細胞培養(yǎng)需要充足經(jīng)驗,新手或者沒有類似細胞培養(yǎng)經(jīng)驗的人建議在專業(yè)人士指導(dǎo)下進行操作,尤其注意無菌操作、貼壁細胞消化時間及細胞培養(yǎng)密度。


2. 部分細胞在傳代后時,會有以下現(xiàn)象:細胞內(nèi)會有黑色小點、細胞間隙有些顆粒物、培養(yǎng)基漂浮一些死細胞。以上都是細胞培養(yǎng)常見現(xiàn)象,不影響細胞增殖和實驗。


3. 細胞內(nèi)的黑色顆粒是細胞外分泌泡、細胞器折光或者細胞膜表面物質(zhì),這個屬于細胞自身特性,無法清除也無法改變,具體情況可以參考ATCC、DSMZ等大型細胞庫細胞照片。細胞外的黑色顆粒大部分是細胞碎片,可以吸走培養(yǎng)基后用PBS潤洗;潤洗不能清除的可以消化細胞重新接種,消化完成后加*培養(yǎng)基終止消化,混勻細胞,收集細胞懸液900-1000rpm(約150g)離心3min,棄上清。再加5ml PBS重懸細胞,再離心后,用*培養(yǎng)基重懸接種到新的培養(yǎng)皿。第二次PBS重懸是為了去除碎片,如果平時碎片比較少,傳代時可以省略PBS重懸的步驟;如果碎片很多,建議PBS多洗幾次。


4. 不同品牌胰M溶液成分不一樣,消化活性差別比較大,更換胰M品牌時需重新摸索消化時間,以消化到細胞間隙變大但未漂浮為準,此時結(jié)束消化最佳,避免消化過度導(dǎo)致細胞死亡。細胞消化后比較脆弱,吹打力度不要過大,不要產(chǎn)生過多氣泡,否則會嚴重影響細胞狀態(tài)。


5. 不同細胞生長速度差異較大,所有細胞收貨后第①次傳代建議按1:2傳代。正常培養(yǎng)時生長較慢、密度較低的細胞需要傳代時按1:2傳代,生長較快、密度較高的細胞可以按1:4傳代。


6. 細胞生長偏慢時,可以將血清濃度增加到15-20%培養(yǎng)一段時間,待細胞狀態(tài)和生長速度恢復(fù)正常后換回10%血清


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