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小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

簡要描述：尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗，能夠為您提供高品質(zhì)的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結(jié)豐富經(jīng)驗的人才，并配備了整套實驗設備，全程自主研發(fā)，嚴控開發(fā)流程，保障產(chǎn)品質(zhì)量，緊抓售后服務，可以提供高質(zhì)量的小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞。已與國內(nèi)外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系，成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

產(chǎn)品型號：SNP-M182
廠商性質(zhì)：生產(chǎn)廠家
更新時間：2023-04-19
訪問量：504

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詳細介紹

品牌	其他品牌	貨號	SNP-M182
規(guī)格	T25瓶	供貨周期	現(xiàn)貨
主要用途	實驗	應用領域	生物產(chǎn)業(yè)

一、細胞基本屬性

貨號：SNP-M182

產(chǎn)品名稱：小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞

物種：小鼠

組織來源:視網(wǎng)膜組織

細胞簡介:該細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內(nèi)分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。視網(wǎng)膜內(nèi)層為襯于血管膜內(nèi)面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側(cè)有一視神經(jīng)乳頭。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經(jīng)元組成。第一神經(jīng)元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處最多。第二層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經(jīng)節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結(jié)構(gòu)，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經(jīng)纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經(jīng)由視神經(jīng)到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力*。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞貼壁后呈單層排列，部分細胞聚集成團，細胞呈圓形或橢圓形，核圓且相對透明，有些細胞膜上伸出短而小的突起；該細胞為高度分化細胞，在體外屬于不增殖群。視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞是青光眼病理性損害的主要細胞，視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞的死亡可導致視功能不可逆損傷，研究視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞損害的細胞學和分子生物學機制有利于青光眼發(fā)病機制的研究。

方法簡介：采用胰蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法，結(jié)合視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)和化學試劑抑制法篩選制備而來，細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系：神經(jīng)元體系

發(fā)貨形式：T25瓶（1×106左右）

規(guī)格：5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件：具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境：37℃，5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠視網(wǎng)膜神經(jīng)節(jié)細胞專用*培養(yǎng)基（產(chǎn)品貨號：SNPM-M182）作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天

培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml；10cm皿12-15ml

傳代比例1:2-1:4（具體情況視細胞生長速度及密度決定）

傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基；

2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s，吸走潤洗的PBS；

3.T25瓶加1ml左右胰酶，輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層；

4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化；

5.消化到細胞間隙變大，但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化；

6.混勻細胞，900rpm離心3-5min，棄上清；

7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞，均勻分到新的培養(yǎng)瓶里；

8.補足*培養(yǎng)基，將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)；

注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大，注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔，不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。

三、細胞凍存操作

凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);

凍存規(guī)格200-300萬/ml，1ml每管

凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后，加配置好的凍存液輕輕重懸細胞；

2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管；

3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒，放入-80度冰箱過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存；沒有程序凍存盒的實驗室，加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min，再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜，第二天轉(zhuǎn)入液氮保存

注意事項凍存細胞轉(zhuǎn)入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性，若有異常，及時調(diào)整實驗方案

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