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小鼠真皮微血管內皮細胞

簡要描述:尚恩生物依托國際化的*技術及多年專業(yè)化的原代細胞分離培養(yǎng)經(jīng)驗,能夠為您提供高品質的原代細胞、原代細胞提取物定制服務。集結豐富經(jīng)驗的人才,并配備了整套實驗設備,全程自主研發(fā),嚴控開發(fā)流程,保障產品質量,緊抓售后服務,可以提供高質量的小鼠真皮微血管內皮細胞。已與國內外多家科研單位、藥企、以及醫(yī)院等建立了良好的合作關系,成為生物醫(yī)藥行業(yè)的誠信伙伴和堅強后盾。

  • 產品型號:SNP-M118
  • 廠商性質:生產廠家
  • 更新時間:2023-04-19
  • 訪  問  量:517
詳細介紹
品牌其他品牌貨號SNP-M118
規(guī)格T25瓶供貨周期現(xiàn)貨
主要用途實驗應用領域生物產業(yè)

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---尚恩生物 ---

一、細胞基本屬性

貨號:SNP-M118

產品名稱:小鼠真皮微血管內皮細胞

物種:小鼠

組織來源:皮膚組織

細胞簡介:該細胞分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網(wǎng)狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。微血管內皮細胞(MEC)在炎癥反應、腫瘤生長、創(chuàng)面愈合過程中起著非常重要的作用。在創(chuàng)面愈合研究領域,由于表皮細胞、真皮成纖維細胞體外培養(yǎng)技術的成熟,人們對這兩種細胞早已進行了大量深入的研究。與之相比,對參與創(chuàng)面愈合過程的另一種主要細胞——真皮微血管內皮細胞,則因其體外分離培養(yǎng)技術的困難而使相關的研究受限。

方法簡介:采用膠原酶-中性蛋白酶混合消化法結合密度梯度離心法、最后通過內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10^5cells/瓶。

配套體系:內皮體系

發(fā)貨形式:T25瓶(1×106左右)

規(guī)格:5×10^5cells/T25瓶

培養(yǎng)條件:具體培養(yǎng)條件詳詢尚恩生物細胞培養(yǎng)技術專員

培養(yǎng)環(huán)境:37℃,5%二氧化碳

我們推薦使用尚恩生物小鼠真皮微血管內皮細胞專用*培養(yǎng)基(產品貨號:SNPM-M118)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。


二、細胞培養(yǎng)操作

換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細胞間隙變大,但未*脫落時加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰酶消化;
6.混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴格控制消化時間

消化傳代細胞時吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。


三、細胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存

注意事項凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案


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