①對已建立細胞系的鑒定:要求能提供細胞的一般和特殊的生物學(xué)性狀指標(biāo)。一般特性指標(biāo)包括:細胞的一般形態(tài)、特異性結(jié)構(gòu)、細胞生長曲線和分裂指數(shù)、倍增時間、接種率、染色體分析、同工崩檢查、DNA指紋圖譜等。特異性指標(biāo)常依據(jù)細胞種類和功能的特異性進行鑒定,比如,若為腺細胞則一般鑒定是否有特殊產(chǎn)物包括分泌蛋白或激素產(chǎn)生;若為腫瘤細胞還應(yīng)能夠證明細胞確系來源于腫瘤組織而非其他,并仍保留有腫瘤組織的特性,為此常需做集落形成實驗、裸鼠致瘤實驗以及對正常組織的侵襲實驗等。
a.正常細胞系的鑒定:鑒定細胞的種系來源,常用方法主要有染色體分析、同工酶分析、DNA指紋圖譜等技術(shù);鑒定細胞的組織來源,可通過形態(tài)學(xué)手段、檢測組織特異性抗原等進行鑒定;細胞是否發(fā)生轉(zhuǎn)化和惡變,主要通過核型分析、細胞生長行為觀察(是否喪失接觸物制)、裸鼠成瘤實驗等進行鑒定;細胞有無發(fā)生交叉污染,主要通過同工酶及DNA指紋圖譜技術(shù)進行鑒定。
b.腫瘤細胞系的鑒定:對腫瘤細胞系的鑒定主要圍繞其惡型性展開,染色體的異常、接觸抑制和密度依賴生長特性的改變、集落形成能力、裸鼠成瘤、動物體內(nèi)的侵襲生長,以及某些基因、分子水平的特征均是腫瘤細胞鑒定的方法。
②已建立細胞系的管理:對已建立的和經(jīng)過鑒定的細胞系,一般除保留在建立者的實驗室外,為了科研交流的方便和保證細胞系的穩(wěn)定性,國際上通行的慣例是將其保存在細胞庫中。在國際上,美、英和日本等國已建有細胞庫。其中,美國的ATCC(American type culturecollection)是美國國立癌癥研究所(NCI)和美國衛(wèi)生研究所中(NIH)的細胞資源庫,也是世界衛(wèi)生組織(WHO)的國際培養(yǎng)細胞文獻中心。同時,ATCC不僅是美國也是世界上較大的細胞庫,現(xiàn)存細胞系超過3200種。ATCC接納來自世界各國已經(jīng)鑒定的細胞予以儲存,同時也向世界各國的研究者或?qū)嶒炇颐赓M提供研究用細胞。
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