磷酸鹽緩沖液使用中的注意事項:
不少緩沖溶液都含有易揮發(fā)組分,如,氨-氯化銨中的氨酷酸-醋酸鈉中的醋酸?,F(xiàn)在,不少實驗室引入了定量加液器,用定量加液器加試劑,具有簡便準(zhǔn)確誤差恒定的特點,特別是在做成批樣品時更顯出它的*性,不少同志也喜歡用它來加緩沖液,但是,應(yīng)注意緩沖液不能長久存放在定量加液器中,因該器皿不密閉,易造成氨的揮發(fā)(醋酸-醋酸鈉緩沖液中的醋酸也同理),從而,導(dǎo)致溶液失效,正確的做法是緩沖液應(yīng)適量配制,使用后及時密閉并置于低溫中保存。
當(dāng)往某些溶液中加入一定量的酸和堿時,有阻礙溶液pH變化的作用,稱為緩沖作用,這樣的溶液叫做緩沖溶液。而磷酸鹽緩沖液是生物化學(xué)研究中使用較為廣泛的一種緩沖劑,因為它們是二級解離,有二個pKa值,所以用它們配制的緩沖液。
磷酸鹽緩沖液優(yōu)點:
① 容易配制成各種濃度的緩沖液;
② 適用的pH范圍寬;
?、?pH受溫度的影響小;
?、?緩沖液稀釋后pH變化小,如稀釋十倍后pH的變化小于0.1。
缺點:
?、?易與常見的鈣Ca2+離子、鎂Mg2+離子以及重金屬離子締合生成沉淀;
?、?會抑制某些生物化學(xué)過程,如對某些酶的催化作用會產(chǎn)生某種程度的抑制作用。
在實際工作中有些分析人員由于不大了解磷酸鹽緩沖液的作用機理,當(dāng)所配制和使用的緩沖溶液與規(guī)定的數(shù)值不相符時,為使緩沖溶液達到要求,就用鹽酸或氫氧化鈉等強酸、強堿進行調(diào)節(jié), 以為這樣做可以使緩沖溶液盡快達到所需要的pH值,然而,結(jié)果卻適得其反,這樣的溶液pH值雖然調(diào)對了,可是它的緩沖體系卻被破壞了,作用也就失去了,緩沖溶液一般都是由弱酸及其弱酸鹽或是弱堿及其弱堿鹽組成的一對共軛體。