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非洲綠猴腎細胞在醫(yī)藥研究中廣泛應用

更新時間:2021-05-11瀏覽:813次

   Vero細胞來源于非洲綠猴腎細胞,被成功的用來培養(yǎng)狂犬病疫苗、乙腦疫苗等多種疫苗,在非典期間又為研究冠狀病毒做出貢獻,在醫(yī)藥研究中廣泛應用。

  形態(tài):上皮細胞
  生長特性:貼壁
  注釋:該細胞是日本千葉大學的Y. Yasumura和Y. Kawakita于1962年3月27日從一只正常的成年非洲綠猴腎組織培養(yǎng)出來的。
  培養(yǎng)液:MEM( 含 2 mM L-谷氨酰胺和 Earle's BSS,1.5 g/L NaHCO3, 0.1 mM 非需氨基酸, 1.0 mM 丙酮酸鈉), 10%胎牛血清
  傳代:吸去培養(yǎng)液。 用 0.25% (w/v) Trypsin- 0.53 mM EDTA洗一次,以去除血清(血清會抑制胰酶的活性)。加2-3毫升Trypsin-EDTA,放在37℃培養(yǎng)箱內(nèi)約5分鐘,直到細胞全部脫落。加6-8毫升培養(yǎng)液,用移液器把細胞吹散。加適量的細胞到新的培養(yǎng)器皿中。(以1:3至1:6為宜,傳代期間培養(yǎng)液每周更換2-3次)
  凍存: 95%培養(yǎng)液+5%DMSO凍存于液氮。
  真核細胞轉(zhuǎn)染是分子生物學研究中的強有力工具。其中脂質(zhì)體介導的細胞轉(zhuǎn)染具有結(jié)果可靠可重復性強的特點。陽離子脂質(zhì)體介導的轉(zhuǎn)染率高低決定于下列參數(shù),如脂質(zhì)體的細胞毒性、轉(zhuǎn)染的細胞種類、DNA用量、DNA與脂質(zhì)體的比例以及脂質(zhì)體的濃度。其中所轉(zhuǎn)染細胞種類對轉(zhuǎn)染效率影響大。對不同的細胞,需要采取不同的轉(zhuǎn)染條件,才能獲得高轉(zhuǎn)染效率和低毒性。
  非洲綠猴腎細胞可能作為表達外源蛋白質(zhì)的有用細胞。作為一種連續(xù)傳代的靈長類細胞,Vero細胞的糖基化酶可能與人類的相似。可以大規(guī)模培養(yǎng),已經(jīng)用于脊髓灰質(zhì)炎病毒疫苗的生產(chǎn)。

 

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