jurkat細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞
更新時(shí)間:2022-08-10瀏覽:980次
jurkat細(xì)胞是一種懸浮細(xì)胞。是用于研究急性T細(xì)胞白血病,T細(xì)胞信號傳導(dǎo)以及易感病毒進(jìn)入的各種趨化因子受體,特別是HIV的表達(dá)的永生化人T淋巴細(xì)胞系。它在生物學(xué)研究上具有十分廣泛的應(yīng)用,比如應(yīng)用Jurkat細(xì)胞研究核糖核酸酶P的M1-RNA,探討抗MHCⅡ類分子轉(zhuǎn)錄激活因子(CⅡTA)的M1-RNA抑制細(xì)胞表面MHCⅡ類分子的表達(dá)。
蛋白酪氨酸激酶(PTK)在淋巴細(xì)胞,尤其是T淋巴細(xì)胞活化過程中起關(guān)鍵的作用。細(xì)胞對外界刺激作出反應(yīng)以調(diào)節(jié)細(xì)胞的進(jìn)程是所有生命進(jìn)程的基礎(chǔ),蛋白的可逆性磷酸化作用是其中許多不同機(jī)制中所必須的,蛋白磷酸化狀態(tài)可由體內(nèi)一類蛋白激酶(如PIK)的活性來得以調(diào)節(jié)。PTK的激活能上調(diào)細(xì)胞內(nèi)的蛋白酪氨酸磷酸化水平,從而激發(fā)下游信號通路。PTK能催化多種底物蛋白質(zhì)酪氨酸殘基磷酸化,在細(xì)胞生長發(fā)育、增殖和分化中具有重要的作用。蛋白酪氨酸的磷酸化作用在信號轉(zhuǎn)導(dǎo)中起中心的作用,細(xì)胞膜上的膽固醇與信號級聯(lián)反應(yīng)通過胞膜傳遞引起淋巴細(xì)胞的活化有關(guān)。
jurkat細(xì)胞感染方法:
1.將一定細(xì)胞量的細(xì)胞用1.5mlEP管中離心收集然后用100-200μl的無血清培養(yǎng)液稀釋細(xì)胞沉淀,以細(xì)胞*浸沒在培養(yǎng)基中為準(zhǔn)。
2.按照MOI計(jì)算所需病毒顆粒數(shù)量,吸取病毒液加入細(xì)胞中,將1.5mlEP管放在37℃度培養(yǎng)箱中孵育30分鐘。
3.將管中混合溶液吸出加到培養(yǎng)皿中或孔里。
4.加入足夠量的新鮮培養(yǎng)液。
5.48小時(shí)后換液。
6.96小時(shí)后觀察細(xì)胞陽性率。