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raw264.7細(xì)胞是一種鼠源的巨噬細(xì)胞系

更新時(shí)間:2022-08-03瀏覽:854次

  raw264.7細(xì)胞是一種鼠源的巨噬細(xì)胞系,RAW264.7細(xì)胞貼壁快,形態(tài)以類圓形和不規(guī)則為主,一般1~2個(gè)核,少數(shù)有3個(gè)核,胞漿伸展時(shí)胞體較大。細(xì)胞貼壁緊,胰酶-EDTA難以消化,需要多次消化吹打,也可采用細(xì)胞刮法。
 
  raw264.7細(xì)胞培養(yǎng)注意事項(xiàng):
 
  1、具有很強(qiáng)的吞噬能力,當(dāng)吞噬抗原后,細(xì)胞會(huì)釋放趨化因子,進(jìn)一步促進(jìn)細(xì)胞伸出偽足,增強(qiáng)粘附攀爬能力。細(xì)胞吞噬抗原過多、培養(yǎng)環(huán)境惡劣都會(huì)促進(jìn)該細(xì)胞呈現(xiàn)梭形、長(zhǎng)梭形,鏡下會(huì)看到具有細(xì)長(zhǎng)偽足的小細(xì)胞被類似上皮的梭形大細(xì)胞取代。
 
  2、每次傳代都很難消化下來。用力過大則對(duì)細(xì)胞損傷較大,這種細(xì)胞傳代時(shí)接種密度要大,否則容易使巨噬細(xì)胞向終末細(xì)胞分化,細(xì)胞變成長(zhǎng)形,并且不能回復(fù),這是培養(yǎng)這種細(xì)胞時(shí)需要注意的問題。
 
  3、生長(zhǎng)時(shí)喜歡結(jié)伴。正常生長(zhǎng)狀態(tài)應(yīng)該是一小片一小片的生長(zhǎng),片片之間不連接,等到長(zhǎng)到更多更密的時(shí)候會(huì)連成大片,并且會(huì)疊加成層。所以,要很好地控制好細(xì)胞的生長(zhǎng)速度,不要等到疊加成層的時(shí)候再傳代。
 
  4、傳代后貼壁時(shí)間較短,半小時(shí)就能貼很多,剛貼壁是細(xì)胞呈圓形,折光度很好,鏡下觀察如小珍珠狀一個(gè)個(gè)地散落于瓶底面。生長(zhǎng)一段時(shí)間后,部分細(xì)胞會(huì)變成類似四角形,伸出偽足之類的。這個(gè)時(shí)候就是提醒你注意傳代了,這部分細(xì)胞如再不傳代,很容易就老化掉。
 
  raw264.7細(xì)胞破骨細(xì)胞分化:在RANKL的誘導(dǎo)下,RAW264.7細(xì)胞可以分化為成熟的破骨細(xì)胞,此時(shí)應(yīng)用破骨細(xì)胞特異性的抗酒石酸酸性磷酸染色(TRAP染色),在有成熟破骨細(xì)胞的部位可見紅色的陽(yáng)性反應(yīng),所以一般認(rèn)為RAW264.7是一種前破骨細(xì)胞。 向破骨細(xì)胞的分化是一個(gè)NF-kb通路依賴的過程,先前的大量研究表明,NF-kb通路受到抑制時(shí),RAW264.7細(xì)胞不能向破骨細(xì)胞的分化。

 

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