国产亚洲欧美日韩99综合aⅴ|午夜国产成人精品aaa视频|色婷婷国产成人精品视频|久久精品免视看成人国产

您的位置: 首頁 > 技術(shù)文章 > 干貨??!SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)傳代標(biāo)準(zhǔn)操作流程

干貨!!SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)傳代標(biāo)準(zhǔn)操作流程

更新時間:2023-02-20瀏覽:774次


 細胞基本信息

 

 

--細 胞 基 本 信 息---

細胞名稱: SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

細胞別稱: SK-Lu-1;SK LU 1;SK-Lu1;SK-LU1;SKLU-1;SKLU1;SKLU01

細胞貨號: SNL-229

生長特性: 貼壁

培養(yǎng)條件: DMEM+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%

細胞簡介: SK-LU-1細胞來源于一名64歲患有肺腺癌(III級)的白人女性。SK-LU-1細胞在免疫耐受大鼠中是致瘤的。SK-LU-1細胞支原體污染于1971年被發(fā)現(xiàn)并消除,可以用于3D細胞培養(yǎng)。

 

 

SK-LU-1細胞正常生長形態(tài)照片

 

 

 

 SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)的特點

 

 


1、細胞顆粒感較重

細胞傳代培養(yǎng)時細胞內(nèi)黑點及細胞外顆粒較多,建議使用優(yōu)質(zhì)血清及培養(yǎng)基培養(yǎng)細胞;


2、傳代、復(fù)蘇注意細胞狀態(tài)

細胞消化或者復(fù)蘇操作不當(dāng)容易導(dǎo)致細胞死亡裂解產(chǎn)生大量碎片及顆粒,進而影響活細胞狀態(tài),注意消化或復(fù)蘇過程盡量輕柔,嚴(yán)格控制消化時間和復(fù)蘇操作規(guī)范,傳代或復(fù)蘇24h后建議觀察細胞,建議換液一次去除死亡細胞;

 

 

細胞收貨攻略


常溫細胞

 

1. T25瓶收貨后,拆開外包裝,用75%酒精消毒T25瓶表面,放37℃培養(yǎng)箱靜置2-4h;

2. 吸走大部分培養(yǎng)基并留10-12 ml,顯微鏡下拍照保存細胞狀態(tài)照片,觀察細胞密度,若細胞密度大于80%即可按比例傳代(傳代比例建議1:2),若細胞密度低于70%可以留10-12 ml繼續(xù)培養(yǎng)至細胞密度80%以上再進行傳代培養(yǎng);

 


凍存細胞

1. 細胞收貨后盡快開箱檢查,若干冰充足可以取出細胞迅速置于-80℃冰箱(2-3天內(nèi)復(fù)蘇)短期保存或液氮中長期保存,若干冰揮發(fā)建議立即復(fù)蘇細胞并聯(lián)系銷售人員解決;

2. 凍存細胞建議盡快復(fù)蘇一管培養(yǎng)檢查,以免超出售后期,復(fù)蘇步驟參考復(fù)蘇攻略;

3. 復(fù)蘇一管細胞出現(xiàn)異常及時聯(lián)系銷售人員,在專業(yè)技術(shù)支持的指導(dǎo)下進行下一步操作;

 

 

Tips:

1. 細胞收貨出現(xiàn)漏液、培養(yǎng)瓶破損、干冰揮發(fā)等異常情況時,及時拍照聯(lián)系銷售人員;

 

2. 該細胞貼壁生長,一般T25瓶運輸過程中較少出現(xiàn)大量細胞脫落并聚團的情況,少量細胞脫落是正常狀態(tài),不影響細胞生長,按正常操作步驟繼續(xù)培養(yǎng)即可。

 

3. 尚恩生物T25瓶發(fā)貨的細胞內(nèi)含對應(yīng)細胞的培養(yǎng)基,可以收集原裝培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基經(jīng)1500rpm離心5min后,取上清于4℃保存用于后續(xù)細胞培養(yǎng);

 

 

細胞傳代攻略

 

 

1. 先盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基,再加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細胞10-20s,吸走潤洗的PBS;

2. T25瓶加1ml左右胰酶,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰酶鋪勻瓶底細胞層,將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;

3. 消化到細胞間隙變大,但未脫落時加2-3ml培養(yǎng)基終止胰酶消化;

4. 混勻細胞,900rpm離心3-5min,棄上清;

5.加新的培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里,補足培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);

 

 

Tips:

1. 對于消化細胞程度,客戶如果經(jīng)驗不多,無法準(zhǔn)確掌控胰酶作用時間,建議客戶按照下述操作:胰酶首先復(fù)溫到室溫后加入細胞,放入37度培養(yǎng)箱,然后每隔30秒,即吹打下細胞(此時吹打細胞應(yīng)盡量輕柔,不能強行將細胞吹下,否則細胞可能出現(xiàn)機械損傷),如果能夠吹打散細胞,說明細胞消化完成可以終止消化,如果30秒吹打不下,再等30秒重復(fù)操作直至能夠輕柔的吹下細胞;

 

2. T25瓶加10-12ml培養(yǎng)基,10cm皿加12-15ml,2-3天換液一次。

 

3. 細胞收貨后傳代建議按1:2傳代,后續(xù)培養(yǎng)可以視具體細胞生長狀態(tài)和密度情況決定傳代比例;

 

4. 傳代后24h建議觀察細胞并換液一次去除死亡細胞;



文獻引用

 

圖片1.png 

 

 

CAT#:            SNL-492

Product name:   SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

Date:            2022/12/23

Journal:         Nature Communications

Impact Factor:   17.694

Title:        

USP5-Beclin 1 axis overrides p53-dependent senescence and drives Kras-induced tumorigenicity

PMID:           PMID: 36528652

 

 


產(chǎn)品推薦

SNL-492】SK-LU-1(人低分化肺腺癌細胞)

SNLM-492】SK-LU-1細胞專用培養(yǎng)基

SNT-0010.25%胰酶(不含EDTA)



 

聯(lián)系我們
  • QQ:1242926414
  • 郵箱:[email protected]
  • 傳真:86-027-87800889
  • 地址:武漢東湖新技術(shù)開發(fā)區(qū)高新二路388號武漢光谷國際生物醫(yī)藥企業(yè)加速器1.2期C22棟二層

掃一掃,關(guān)注公眾號

©2024 武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有    備案號:鄂ICP備2020018368號-2    技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng)    Sitemap.xml    總訪問量:139805    管理登陸