簡要描述:TF-1(人紅白血病細(xì)胞)是由Kitamura·T等人于1987年建立,源于一名35歲日本男性的肝素化骨髓抽取樣本,該患者具有嚴(yán)重的全血細(xì)胞減少癥。TF-1細(xì)胞生長*依賴于IL-3或GM-CSF,對(duì)IL-5無反應(yīng)。多種淋巴因子和細(xì)胞因子對(duì)TF-1細(xì)胞都有作用,如:IL-1、IL-4、IL-6、IL-9、IL-11、IL-13、CSF、LIF、NGF。
品牌 | 其他品牌 | 貨號(hào) | SNL-222 |
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規(guī)格 | T25 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科學(xué)研究 | 應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱:TF-1(人紅白血病細(xì)胞)
細(xì)胞別稱:TF1; MFD-1
細(xì)胞貨號(hào):SNL-222
細(xì)胞種屬:人
生長情況:懸浮
培養(yǎng)條件:1640 +10%FBS+1%雙抗+2ng/mL GM-CSF
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1.混勻細(xì)胞,收集細(xì)胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
2.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
3.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng):部分懸浮細(xì)胞會(huì)附著瓶底,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)基或者吹打細(xì)胞面就會(huì)脫落,不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細(xì)胞操作,吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng):凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips:
1.細(xì)胞需添加GM-CSF培養(yǎng),否則細(xì)胞狀態(tài)將變差至無法增殖。建議購買配套的*培養(yǎng)基培養(yǎng)該細(xì)胞,貨號(hào)SNLM-222。
我們推薦使用尚恩生物TF-1(人紅白血病細(xì)胞)*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNLM-222)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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