簡要描述:AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)生長時不貼壁,而結成細胞團懸浮生長。研究表明,AtT-20細胞能抗脊髓灰質炎病毒。
品牌 | 其他品牌 | 貨號 | SNL-239 |
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規(guī)格 | T25 | 供貨周期 | 現(xiàn)貨 |
主要用途 | 科學研究 | 應用領域 | 生物產業(yè) |
一、細胞基本屬性
細胞名稱:AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)
細胞別稱:AtT20; AtT 20; ATT-20
細胞貨號:SNL-239
細胞種屬:小鼠
生長情況:聚團懸浮
培養(yǎng)條件:F12K+15%HS+2.5%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境:air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細胞培養(yǎng)操作
換液周期:2-3天
培養(yǎng)基體積:T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例:1:2-1:4(具體情況視細胞生長速度及密度決定)
傳代方法:
1.輕輕吸走培養(yǎng)上清,留2-3ml培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面吹下細胞;
2.混勻細胞,收集細胞培養(yǎng)基,900rpm離心3-5min,棄上清;
3.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
4.補足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項;半貼壁細胞會附著瓶底,但貼壁不緊,輕輕吸取培養(yǎng)基輕輕吹打細胞面就會脫落,不需要胰m消化。建議使用培養(yǎng)皿培養(yǎng),更適合吹打細胞操作,吹打細胞注意盡量輕柔,不要產生過多氣泡以免影響細胞狀態(tài)。
三、細胞凍存操作
凍存液配方:92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格:200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法:
1.消化并離心獲得細胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細胞;
2.將細胞懸液盡快移入已經做好標記的凍存管;
3.將凍存管轉入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉入液氮保存;沒有程序凍存盒的實驗室,加入細胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉入-80度過夜,第二天轉入液氮保存
注意事項:凍存細胞轉入液氮后及時復蘇一管檢查細胞凍存活性,若有異常,及時調整實驗方案
Tips:
細胞懸浮生長,大部分聚集成葡萄串狀生長,太大團塊應及時吹散避免中央細胞營養(yǎng)不足死亡,小團塊無需處理。
我們推薦使用尚恩生物AtT-20(小鼠垂體瘤細胞)*培養(yǎng)基(產品貨號:SNLM-239)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
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