簡(jiǎn)要描述:CALU-3(人肺腺癌(胸水)細(xì)胞)是從一名25歲的白人男性肺腺癌患者的胸水中分離建系的;該患者曾使用過(guò)環(huán)*酰*、博來(lái)*素、阿*素進(jìn)行治療。Calu-3細(xì)胞接種至裸鼠可成瘤;Calu-3細(xì)胞亦可作轉(zhuǎn)染宿主。
產(chǎn)品目錄Product center
品牌 | 其他品牌 | 分子式 | CALU-3 |
---|---|---|---|
貨號(hào) | SNL-214 | 規(guī)格 | T25 |
供貨周期 | 現(xiàn)貨 | 主要用途 | 科學(xué)研究 |
應(yīng)用領(lǐng)域 | 生物產(chǎn)業(yè) |
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱(chēng) :CALU-3(人肺腺癌(胸水)細(xì)胞)
細(xì)胞別稱(chēng) :CaLu-3; CALU-3; Calu 3; Calu3; CALU3
細(xì)胞貨號(hào) :SNL-214
細(xì)胞種屬 :人
生長(zhǎng)情況 :貼壁
培養(yǎng)條件 :H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境 :air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期 :2-3天
培養(yǎng)基體積 :T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例 :1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長(zhǎng)速度及密度決定)
傳代方法 :
1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤(rùn)洗細(xì)胞10-20s,吸走潤(rùn)洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰m,輕輕晃動(dòng)培養(yǎng)瓶以使胰m鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰m消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng) :不同品牌胰m消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過(guò)多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方 :92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格 :200-300萬(wàn)/ml,1ml每管
凍存方法 :
1.消化并離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2.將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3.將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒(méi)有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過(guò)夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng) :凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案
Tips:
1.細(xì)胞貼壁較緊,消化時(shí)間偏長(zhǎng)。消化時(shí)邊緣細(xì)胞先脫落,可以吸取正在消化的胰m吹下細(xì)胞收集起來(lái),再加新的胰m繼續(xù)消化剩下的細(xì)胞;
2.細(xì)胞生長(zhǎng)十分緩慢,傳代建議按1:2,傳代前密度不要過(guò)低。
我們推薦使用尚恩生物CALU-3(人肺腺癌(胸水)細(xì)胞)*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號(hào):SNLM-214)作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
掃一掃,關(guān)注公眾號(hào)
©2024 武漢尚恩生物技術(shù)有限公司 版權(quán)所有 備案號(hào):鄂ICP備2020018368號(hào)-2 技術(shù)支持:化工儀器網(wǎng) Sitemap.xml 總訪(fǎng)問(wèn)量:139805 管理登陸
電話(huà)
微信掃一掃