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293T(人胚腎細(xì)胞)

簡要描述:293T(人胚腎細(xì)胞)是293T細(xì)胞株的衍生株,293T是293 [HEK-293]細(xì)胞株插入了SV40 T-antigen的溫度敏感基因形成的高轉(zhuǎn)衍生株。293T細(xì)胞進(jìn)行克隆,檢測pBND和pZAP載體,得到—株能生成高滴度感染逆轉(zhuǎn)錄病毒的衍生株293T細(xì)胞。293T細(xì)胞持續(xù)表達(dá)猿病毒40(SV40)大T抗原,而因其高轉(zhuǎn)染能力篩選到17號克隆。

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):生產(chǎn)廠家
  • 更新時(shí)間:2023-06-15
  • 訪  問  量:2859
詳細(xì)介紹
品牌其他品牌供貨周期現(xiàn)貨
應(yīng)用領(lǐng)域生物產(chǎn)業(yè)
一、細(xì)胞基本屬性
細(xì)胞名稱人胚腎細(xì)胞
細(xì)胞別稱293T
細(xì)胞貨號SNL-015
細(xì)胞種屬
生長情況貼壁
培養(yǎng)條件H-DMEM+10%FBS+1%雙抗
培養(yǎng)環(huán)境air, 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
二、細(xì)胞培養(yǎng)操作
換液周期2-3天
培養(yǎng)基體積T25瓶10-12ml;10cm皿12-15ml
傳代比例1:2-1:4(具體情況視細(xì)胞生長速度及密度決定)
傳代方法1.盡量吸干凈T25瓶原培養(yǎng)基;
2.加3-4ml 常溫PBS輕輕潤洗細(xì)胞10-20s,吸走潤洗的PBS;
3.T25瓶加1ml左右胰M,輕輕晃動培養(yǎng)瓶以使胰M鋪勻瓶底細(xì)胞層;
4.將培養(yǎng)瓶放入37度培養(yǎng)箱消化;
5.消化到細(xì)胞間隙變大,但未*脫落時(shí)加2-3ml*培養(yǎng)基終止胰M消化;
6.混勻細(xì)胞,900rpm離心3-5min,棄上清;
7.加新的*培養(yǎng)基輕輕重懸細(xì)胞,均勻分到新的培養(yǎng)瓶里;
8.補(bǔ)足*培養(yǎng)基,將培養(yǎng)瓶放回培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng);
注意事項(xiàng)不同品牌胰M消化時(shí)間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時(shí)間
消化傳代細(xì)胞時(shí)吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)。
三、細(xì)胞凍存操作
凍存液配方92%FBS+8%DMSO(新手推薦)或92%*培養(yǎng)基+8%DMSO(高手推薦);
凍存規(guī)格200-300萬/ml,1ml每管
凍存方法1. 離心獲得細(xì)胞沉淀后,加配置好的凍存液輕輕重懸細(xì)胞;
2. 將細(xì)胞懸液盡快移入已經(jīng)做好標(biāo)記的凍存管;
3. 將凍存管轉(zhuǎn)入程序凍存盒,放入-80度冰箱過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存;沒有程序凍存盒的實(shí)驗(yàn)室,加入細(xì)胞后可以將凍存管放在泡沫盒中4度靜置5-10min,再-20度靜置2h后轉(zhuǎn)入-80度過夜,第二天轉(zhuǎn)入液氮保存
注意事項(xiàng)凍存細(xì)胞轉(zhuǎn)入液氮后及時(shí)復(fù)蘇一管檢查細(xì)胞凍存活性,若有異常,及時(shí)調(diào)整實(shí)驗(yàn)方案

Tips:
1.細(xì)胞貼壁較弱,消化時(shí)間偏短,注意控制消化時(shí)間;
2.T25瓶細(xì)胞發(fā)貨易漂浮成團(tuán),收貨若成團(tuán)按收貨處理規(guī)定進(jìn)行;
3.細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)可能會有部分黑點(diǎn),屬正常現(xiàn)象,具體原因參見培養(yǎng)操作說明2、3條;

我們推薦使用尚恩生物293T(人胚腎細(xì)胞)zhuan用*培養(yǎng)基(產(chǎn)品貨號:SNLM-015)作為體外培養(yǎng)293T(人胚腎細(xì)胞)的培養(yǎng)基。


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