293細(xì)胞是指來源于人類胎肺緊序細(xì)胞的一系列細(xì)胞株
更新時(shí)間:2024-01-03瀏覽:784次
293細(xì)胞是指來源于人類胎肺緊序細(xì)胞的一系列細(xì)胞株,具有廣泛應(yīng)用于生物醫(yī)學(xué)研究和生產(chǎn)的潛力。這些細(xì)胞起源于1973年從人類胎肺提取的一種胎兒肺腺瘤細(xì)胞。經(jīng)過多年的培養(yǎng)和傳代,這些細(xì)胞株獲得了一定的穩(wěn)定性和一致性。特點(diǎn)是其對(duì)病毒的易感性。研究者利用這些細(xì)胞株,可以選擇性地導(dǎo)入不同的質(zhì)?;虿《?,從而實(shí)現(xiàn)對(duì)相關(guān)蛋白的大規(guī)模表達(dá)和功能研究。此外,可以通過高效而穩(wěn)定的轉(zhuǎn)染技術(shù),用于大規(guī)模制備重組蛋白和病毒顆粒。
293細(xì)胞的存儲(chǔ)措施:
1.培養(yǎng)基:常用的培養(yǎng)基為DMEM高糖培養(yǎng)基,通常添加10-15%的胎牛血清(FBS)作為生長因子。培養(yǎng)基必須去除菌液,并且在4℃保存。
2.培養(yǎng)室條件:需要在無菌的培養(yǎng)室中培養(yǎng)。一般情況下,培養(yǎng)室的溫度應(yīng)保持在37℃,濕度約為95%,并且氣體控制為5%CO2和95%空氣。此外,應(yīng)定期對(duì)培養(yǎng)室進(jìn)行消毒,以保持無菌環(huán)境。
3.細(xì)胞傳代:當(dāng)達(dá)到80-90%的密度時(shí),需要進(jìn)行傳代來保持細(xì)胞的正常生長。傳代時(shí),使用無菌的PBS緩沖液洗滌細(xì)胞,然后使用0.25%胰蛋白酶-EDTA溶液將細(xì)胞從培養(yǎng)瓶中剝離,并用新的培養(yǎng)基重新分裝。
4.細(xì)胞檢測:為了確保純度和生長狀態(tài),應(yīng)定期對(duì)細(xì)胞進(jìn)行檢測??梢允褂蔑@微鏡觀察細(xì)胞形態(tài),或者進(jìn)行細(xì)胞活力檢測和染色體核型分析。
5.避免污染:污染是眾多細(xì)胞培養(yǎng)實(shí)驗(yàn)中常見的問題,因此必須采取措施確保不受細(xì)菌、真菌和病毒等污染。遵循無菌實(shí)驗(yàn)操作程序,并對(duì)培養(yǎng)器具、試劑和培養(yǎng)基進(jìn)行嚴(yán)格的消毒和清潔。
6.儲(chǔ)存和保存:可以在液氮中冷凍保存。在進(jìn)行冷凍保存時(shí),應(yīng)使用適當(dāng)?shù)膬龃嬉?,快速冷凍并?chǔ)存于-80℃或更低溫度。在保存期間,需要定期檢查和更換培養(yǎng)條件,以確保凍存細(xì)胞的存活率。