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如何正確使用無血清凍存液凍存MG63細(xì)胞?

更新時間:2023-02-13瀏覽:558次

細(xì)

 

細(xì)胞名稱: MG63(人骨肉瘤細(xì)胞)

細(xì)胞別稱: M-G63;MG63

細(xì)胞貨號: SNL-229

生長特性: 貼壁

培養(yǎng)條件: DMEM+10% FBS+1% P/S

培養(yǎng)環(huán)境: 空氣,95%;二氧化碳 (CO2),5%

細(xì)胞簡介: MG63細(xì)胞是從一名患有骨肉瘤的14歲白人男性患者的左股骨中分離出來成纖維細(xì)胞形態(tài)的細(xì)胞,表達(dá)TGF-β RI、TGF-β RII,使用聚肌苷-多肽酸、環(huán)己酰亞胺和放線菌素D可以誘導(dǎo)MG63細(xì)胞產(chǎn)生大量干擾素。MG63細(xì)胞可以用于3D細(xì)胞培養(yǎng),也是一種合適的轉(zhuǎn)染宿主。

MG63細(xì)胞正常生長形態(tài)照片

 


提問

MG63可以用無血清凍存液凍存嗎?

回答

可以使用。不同品牌的凍存液凍存效果可能不一樣,建議凍存后次日復(fù)蘇一管檢測細(xì)胞活率及狀態(tài)沒有問題后再將剩余凍存細(xì)胞放置液氮中保存。

 

 

不同品牌胰酶消化時間差別較大,注意嚴(yán)格控制消化時間

 

消化傳代細(xì)胞時吹打細(xì)胞注意盡量輕柔,不要產(chǎn)生過多氣泡以免影響細(xì)胞狀態(tài)

 

 

無血清凍存液的使用方法分享

選擇凍存處于對數(shù)生長期的細(xì)胞有助于提高復(fù)蘇細(xì)胞存活率。

1.按照常用方法收集懸浮細(xì)胞或貼壁細(xì)胞于離心管中;

2.按照培養(yǎng)細(xì)胞密度和所用細(xì)胞凍存管的尺寸計算所需凍存細(xì)胞數(shù);

3.取所需細(xì)胞數(shù)的細(xì)胞懸浮液置于離心管中,900rpm離心3min,棄上清;

4.加入適量的無血清型細(xì)胞凍存液于離心管中,使細(xì)胞濃度為1x106至2x106 cells/ml,緩慢地混合均勻,制成細(xì)胞混合液;

5.將離心管中的細(xì)胞混合液分裝于已標(biāo)示細(xì)胞名稱的凍存管中;

6.直接將含細(xì)胞混合液的凍存管放入-80℃冰箱,過夜冷凍保存,第二天移至-196℃液氮罐。

 


 

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