隨著實(shí)驗(yàn)室細(xì)胞培養(yǎng)的發(fā)展,除了原代培養(yǎng)之外,還將建立開發(fā)或獲得眾多的細(xì)胞系。每一個(gè)細(xì)胞系均擴(kuò)大了其起源細(xì)胞的應(yīng)用,成為有價(jià)值的資源。若該細(xì)胞系頗為*,則其可能是不可替換的;替換至少也是昂貴與耗時(shí)的。因此,必須通過保存細(xì)胞系來保證這種重要投資。
由于培養(yǎng)早期傳代培養(yǎng)的選擇,有限細(xì)胞系的衰老以及連續(xù)細(xì)胞系的遺傳和表現(xiàn)不穩(wěn)定性,使細(xì)胞系在連續(xù)培養(yǎng)時(shí)有變異傾向。
此外,即使在管理好的實(shí)驗(yàn)室中也有可能發(fā)生儀器故障和污染。交叉污染以及錯(cuò)誤辨識(shí)的發(fā)生率也很高。因此,存在諸多理由進(jìn)行冷凍儲(chǔ)存細(xì)胞,總體概述有幾大不得不凍存細(xì)胞的理由:
①由于遺傳不穩(wěn)定性而導(dǎo)致基因漂移;
②衰老,最后導(dǎo)致細(xì)胞系消失;
③生長(zhǎng)特性的轉(zhuǎn)化以及惡性相關(guān)特性的獲得;
④由于選擇和去分化導(dǎo)致表型的不穩(wěn)定性;
⑤微生物污染;
⑥其他細(xì)胞系的交叉污染;
⑦由于操作粗心而導(dǎo)致的錯(cuò)誤鑒別;
⑧孵育箱故障;
⑨對(duì)于保存那些不立即使用的細(xì)胞系,可節(jié)省時(shí)間和材料;
⑩需要將細(xì)胞系轉(zhuǎn)給其他使用者。
在考慮凍存細(xì)胞之前,需滿足以下特定條件:
01
確認(rèn)凍存前需證實(shí)細(xì)胞系未受污染,且確為該細(xì)胞系。盡管對(duì)于新獲得的細(xì)胞系,可以在*確認(rèn)前凍存幾支,但在大量?jī)龃媲皯?yīng)進(jìn)行*確認(rèn)。
凍存時(shí)間,如果是有限細(xì)胞系,這些細(xì)胞應(yīng)經(jīng)5代倍增生長(zhǎng),獲得足夠量的細(xì)胞再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系應(yīng)將其克隆化,選擇特征性的克隆,待生長(zhǎng)至足夠數(shù)量再進(jìn)行凍存。連續(xù)細(xì)胞系有其優(yōu)勢(shì):它們可無限生長(zhǎng),生長(zhǎng)比較迅速,容易克隆,但是它們?nèi)狈z傳穩(wěn)定性。有限細(xì)胞系通?;蚪咏扼w。在一定傳代水平間是穩(wěn)定的,但是,它們很難克隆,生長(zhǎng)緩慢,最終死亡或發(fā)生轉(zhuǎn)化。
02
推薦產(chǎn)品
【SNL-018】人胚肺細(xì)胞
【SNS-002】特級(jí)胎牛血清
【SNM-002D】DMEM高糖(含丙酮酸鈉、谷氨酰胺,含雙抗)
公司介紹
武漢尚恩生物技術(shù)有限公司坐落于武漢東湖區(qū)光谷生物城,專注于細(xì)胞及系列產(chǎn)品的研發(fā)、生產(chǎn)和服務(wù),公司建有標(biāo)準(zhǔn)化GMP實(shí)驗(yàn)室、動(dòng)物房,已整體通過ISO 9001:2015質(zhì)量管理體系認(rèn)證,獲得企業(yè)、3551人才、瞪羚企業(yè)、科技小巨人等多項(xiàng)榮譽(yù)。
公司主要研發(fā)生產(chǎn)細(xì)胞系、原代細(xì)胞、胎牛血清、基礎(chǔ)培養(yǎng)基、*培養(yǎng)基、輔助試劑等系列產(chǎn)品,提供細(xì)胞及培養(yǎng)配套產(chǎn)品一站式采購;細(xì)胞庫凍存細(xì)胞系500余種,同時(shí)通過不間斷引種細(xì)胞擴(kuò)大豐富細(xì)胞種類;公司還提供人源細(xì)胞系的STR鑒定、大小鼠的種屬鑒定服務(wù)等。
END
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