我們現(xiàn)在所知道的地球上的生命，人類、動物、植物，還有肉眼看不見的微觀世界，這些林林總總的生命體都是由細胞所組成的。所以，生命體如何繁衍、變化、進化，組成紛繁復雜的大千世界，全都是依靠這些細胞在工作。細胞也有各式各樣不同的分類，其中有一類細胞它很特殊，而且擁有其他細胞不具有的一項重要功能——不斷繁衍、自我復制、自我更新。這類細胞就是干細胞。

　　人正常肝細胞培養(yǎng)步驟：

　　1）培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備：

　　1.準備培養(yǎng)基；

　　2.培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%溫度：37攝氏度，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%；

　　3.凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配。液氮儲存。

　　2）細胞處理：

　　復蘇細胞：將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜（或?qū)⒓毎麘乙杭尤雔Ocm皿中，加入約8ml培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并檢查細胞密度。細胞傳代：如果細胞密度達80%-90%即可進行傳代培養(yǎng)。

　　對于貼壁細胞，傳代可參考以下方法：棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2ml消化液于培養(yǎng)瓶中，置于37°C培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加l-2mL培養(yǎng)液后吹勻。將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。