環(huán)境保持

相信很多新手朋友都會(huì)遇到這種情況，自己培養(yǎng)的細(xì)胞養(yǎng)的好好的，突然有一天細(xì)胞培養(yǎng)基渾濁了、變黃、飄著一些霉菌團(tuán)或者顯微鏡下全是樹(shù)枝樣的霉菌菌絲，起初還只是一兩個(gè)培養(yǎng)瓶有這種情況，過(guò)段時(shí)間就大面積都出現(xiàn)這種情況了。出現(xiàn)以上情況的時(shí)候，很多剛開(kāi)始接觸細(xì)胞培養(yǎng)的人都不知道怎么污染的，更不知道如何處理。那么接下來(lái)，小編就帶你們看看怎么從環(huán)境上降低細(xì)胞被污染的概率。

首先我們要知道，造成細(xì)胞污染的污染物不是憑空產(chǎn)生的，而是環(huán)境或者人為帶入的，那么我們就要從環(huán)境和個(gè)人方面入手。接下來(lái)，就讓我們?cè)敿?xì)的了解下具體需要注意哪些事項(xiàng)吧。

一、 細(xì)胞室設(shè)計(jì)

細(xì)胞室設(shè)計(jì)可別小看這點(diǎn)，很多實(shí)驗(yàn)室長(zhǎng)期出現(xiàn)污染都與這個(gè)有很大關(guān)系。

1. 細(xì)胞室應(yīng)設(shè)計(jì)合理的通風(fēng)、緩沖區(qū)域。

細(xì)胞室的空氣要保持清潔，需要對(duì)流入的空氣進(jìn)行過(guò)濾，防止外界污染通過(guò)空氣傳播。人員進(jìn)入細(xì)胞室，需要經(jīng)過(guò)緩沖室，緩沖室的作用就是避免開(kāi)門(mén)進(jìn)出時(shí)外界的空氣直接與細(xì)胞室內(nèi)流通，同時(shí)還有另外一個(gè)功能，就是人員穿戴實(shí)驗(yàn)服、防具的可以在這里進(jìn)行，避免人體身上灰塵、皮屑等直接進(jìn)入細(xì)胞室。

2. 細(xì)胞室位置避免陽(yáng)光直射、隔離水源、通風(fēng)良好。

避免陽(yáng)光直射，可以直接降低細(xì)胞室夏天的空調(diào)費(fèi)用，這個(gè)應(yīng)該沒(méi)有人有疑問(wèn)。不過(guò)還有另外一個(gè)重要原因，我們目前培養(yǎng)的細(xì)胞大部分都是37度培養(yǎng)的，所以氣溫需要維持37度以下，甚至部分國(guó)產(chǎn)培養(yǎng)箱需要保持室溫30度以下才能正常工作。隔離水源可以避免水池里滋生的各種細(xì)菌、真菌等，降低實(shí)驗(yàn)室污染概率，切忌圖方便將水源引入細(xì)胞室，否則管理不善的話很容易出現(xiàn)各種污染的情況。細(xì)胞室需要經(jīng)常保持通風(fēng)，通風(fēng)可以降低空氣濕度，尤其是南方梅雨季節(jié)，降低空氣濕度可以減少霉菌滋生的情況。

3. 細(xì)胞室超凈臺(tái)、生物安全柜應(yīng)擺放合理。

超凈臺(tái)、安全柜都是通過(guò)過(guò)濾空氣來(lái)防止污染的，所以彼此之間應(yīng)留出一定空間，避免出現(xiàn)互相吹風(fēng)，影響各自工作的情況。

二、 個(gè)人裝備

個(gè)人裝備可以有效的防止人體自身攜帶的污染物污染細(xì)胞，同時(shí)也能為實(shí)驗(yàn)者提供可靠的防護(hù)。

1. 換鞋，穿戴實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩是進(jìn)入細(xì)胞室必須的。

細(xì)胞室是潔凈的環(huán)境，而人體自身會(huì)攜帶諸多污染物進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室。換鞋，穿戴實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩可以很大程度上避免沾染的泥土、灰塵、皮屑、毛發(fā)、口腔細(xì)菌、支原體所致的污染。

2. 實(shí)驗(yàn)服、手套、口罩可以給實(shí)驗(yàn)者提供防護(hù)。

有部分細(xì)胞是會(huì)表達(dá)一些病毒的，而且很多細(xì)胞都是人體瘤細(xì)胞，相信實(shí)驗(yàn)者都不想直接接觸這些細(xì)胞，那么合理使用個(gè)人防護(hù)道具可以避免直接接觸，降低實(shí)驗(yàn)者心理壓力。

三、環(huán)境維持

有合理設(shè)計(jì)的實(shí)驗(yàn)室，合理使用個(gè)人裝備還不夠，還需要定期對(duì)環(huán)境進(jìn)行維護(hù)，掃除漏網(wǎng)之魚(yú)。

1. 細(xì)胞室應(yīng)定期紫外消毒。

細(xì)胞室內(nèi)應(yīng)在固定位置安裝紫外殺菌燈，通過(guò)紫外、臭氧雙重作用殺滅可能存在的污染物，保持環(huán)境潔凈。最好有定時(shí)開(kāi)關(guān)，每天晚上人離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室后，對(duì)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行1-2h的紫外殺菌。

2. 培養(yǎng)箱應(yīng)定期清洗消毒。

培養(yǎng)箱是至關(guān)重要的一環(huán)，一旦污染，不加控制的話，勢(shì)必造成大面積污染的情況。培養(yǎng)箱建議1-2周換水一次，2-3個(gè)月進(jìn)行一次清洗、整體消毒。如果平時(shí)污染比較嚴(yán)重的話，可以縮短消毒周期，避免長(zhǎng)時(shí)間使用導(dǎo)致污染累積爆發(fā)。

3. 超凈臺(tái)、安全柜每次使用后應(yīng)擦干凈臺(tái)面、紫外照射。

使用后用75%酒精棉擦干凈臺(tái)面，可以保持臺(tái)面清潔，美觀。使用超凈臺(tái)前，一定要紫外殺菌1-2h方可開(kāi)始實(shí)驗(yàn)。

4. 細(xì)胞室地面應(yīng)定期用消毒液拖地。

地面是污染物最嚴(yán)重的地方，需要經(jīng)常用84消毒液拖地，保持地面清潔。

5. 各種臺(tái)面、冰箱內(nèi)部定期清洗消毒。

這些地方也是容易藏污納垢的地方，一定要經(jīng)常用75%酒精擦洗干凈，保持清潔。

好了，今天分享的細(xì)胞培養(yǎng)經(jīng)驗(yàn)就到此為止了，我們下期再見(jiàn)。

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