原代細胞復蘇的操作步驟:
(1)從液氮容器中取出凍存管,直接浸入37℃溫水中,并不時搖動令其盡快融化。
(2)從37℃水浴中取出凍存管,75%酒精消毒后,打開蓋子,用吸管吸出細胞懸液,加到離心管中。PriCells推薦接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。
(3)離心,1000rpm,5min。PriCells推薦不離心。
(4)棄去上清液,加入含10%小牛血清培養(yǎng)液重懸細胞,計數(shù),調(diào)整細胞密度,接種培養(yǎng)瓶,37℃培養(yǎng)箱靜置培養(yǎng)。PriCells推薦小牛血清濃度依據(jù)原代細胞種類。
(5)次日更換一次1/2培養(yǎng)液,繼續(xù)培養(yǎng)。
原代細胞復蘇操作注意事項:
(1)將凍存管從液氮容器中取出時,要做好防護工作,以免凍傷。
(2)取出凍存管后立即放入水浴中,使其盡快融化(在1-2分鐘內(nèi))。
(3)復蘇*好用新配制的培養(yǎng)液。