細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞中使用
更新時(shí)間:2021-07-08瀏覽:1178次
細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是化學(xué)組成比較復(fù)雜的液體培養(yǎng)基。合適的培養(yǎng)基可支持細(xì)胞多次傳代培養(yǎng)。標(biāo)準(zhǔn)的培養(yǎng)基成分包括鹽、碳水化合物、維生素、氨基酸、生長因子、代謝的前體物質(zhì)、激素和微量元素組成。不同細(xì)胞系對(duì)營養(yǎng)的需求不同,因而有許多不同的培養(yǎng)基配方。
絕大多細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基是建立在平衡鹽溶液(BSS)基礎(chǔ)上,添加了氨基酸、維生素和其它與血清中濃度相似的營養(yǎng)物質(zhì)。廣泛應(yīng)用的培養(yǎng)基是Eearle's MEM的混合物,其中含有13種必需氨基酸、8種維生素。而Ham/sF12也包括非需要氨基酸,維生素的范圍亦很廣,另外常規(guī)含有無機(jī)鹽和代謝添加劑(例如核苷酸)。MEM/F12這兩種培養(yǎng)基各取1/2,形成神經(jīng)生物學(xué)通用的培養(yǎng)基。
細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基現(xiàn)應(yīng)用于快速生長的細(xì)胞,同MEM含有相同的營養(yǎng)成分,但濃度高出2~4倍。選擇某種培養(yǎng)基,應(yīng)仔細(xì)了解成分表,應(yīng)知道大多數(shù)情形下培養(yǎng)基都有不足。例如,有些培養(yǎng)基在氨基酸中包括有谷氨酸,而這種培養(yǎng)基雖廣泛用于神經(jīng)生物學(xué)領(lǐng)域,但它對(duì)某些對(duì)谷氨酸敏感的可能有細(xì)胞外毒性損傷的神經(jīng)元而言,則并非*,特別是如果神經(jīng)元生長在缺乏膠質(zhì)的環(huán)境中時(shí)。F12中含有硫酸亞鐵,據(jù)報(bào)道也有神經(jīng)毒效應(yīng)。
細(xì)胞在單純的基礎(chǔ)培養(yǎng)基中不能存活,在特殊類型的細(xì)胞培養(yǎng)中需要提供某些痕量營養(yǎng)物質(zhì)及生長因子才能使細(xì)胞得以生長并維持生長狀態(tài)。基礎(chǔ)培養(yǎng)基常常要添加血清,血清終濃度多為5~20%。特殊用途的血清來源須用經(jīng)驗(yàn)確定,廣泛應(yīng)用的血清種類有馬血清與胎牛血清。胎牛血清中富含有絲分裂因子,常選其作增殖細(xì)胞用的血清,也用于細(xì)胞系和原代培養(yǎng)。而馬血清常常用來作有絲分裂后的神經(jīng)元培養(yǎng)。